酶联免疫斑点读板机检测生产厂家实验步骤与原理示意 （示意图如下）
大致原理上分为如下7个步骤，详情已具体产品说明书为准
Step.1 包被：将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育：在有刺激的情况下加入细胞，孵育，细胞分泌细胞因子
Step.3 捕获分泌物：activation后的细胞，分泌的细胞因子被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody：去除细胞，清洗平板，加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物：加入链霉亲和素偶联物，保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物：当酶催化时，显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析：在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
ELISPOT分析仪
●专Li立体3D双光照明系统：
● 彩色成像及分析系统：
●高精度X－Y定位载板台：
● 通用性强：
● 自动聚焦：
●高灵敏性，高特异性的优点：
●动态“像素周围识别”，模糊、弥散、过大、过小斑点以及高背景或不规则背景均可检测。
●高分辨率：
●边沿识别系统：
●光密度值测定：
●特有的WASH OUT背景补偿功能
●测量结果可信：
●用户自定义参数和再分析：
●“One－Click”测量区域选择：
直观的板孔选择界面，可轻松进行单孔、任意孔区域、全板扫描。
●智控分析方式：
●数据分析全面：
●直接输出模式：
●检测快速：
●欧盟CE认证、符合21 CFR PART 11认证要求
●软件方面
预设试验分析模式、方便使用；分析参数开放、人机互动更加可靠
●历史悠久，产品成熟度高、文献量大：
30多年历史验证，1500多个实验室成功使用，国内有50多的单位成功使用，无技术和应用风险。
酶联免疫斑点读板机检测生产厂家原理
将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养，在有刺激的条件下，细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后，被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识，其后再与酶标记的亲和素作用，并加入底物使其呈色，有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stained spots。
1. 加入细胞到含有（或不含）刺激物中培养；
2. 阳性细胞开始分泌细胞因子，细胞因子就近被包被Antibody捕获；
3. 移出细胞，清洗板子，加入生物素标记的检测Antibody，形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构；
4. 为了观察膜上斑点的形成，加入酶标记的亲和素；
5. 加入显色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，就近沉淀在局部的膜上形成斑点；
6. 斑点计数（可用bioreader自动读板仪计数），数据处理，结果分析。
为什么选择酶联免疫斑点读板机检测生产厂家？为什么选择酶联免疫斑点读板机检测生产厂家？
高灵敏度：20万-30万中1个阳性细胞检测率；
直观、可信度高：单细胞水平检测，一个阳性细胞一个斑点，斑点数量代表分泌细胞因子的细胞数量多少，斑点大小代表该细胞分泌细胞因子水平的多少；
高通量：一块ELISPOT板可作96test，科研工作者每天可检测数百个样品，只需少量细胞如45mL血液就足以用于测试600种不同抗原/肽类物质的反应；
Living cells功能检测：检测到的细胞因子不是已存在的，而是在检测过程中，被加入的刺激物刺激而分泌出来的；
临床实验适用：经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能，对临床试验非常重要，Before and after treatment的样本可以进行平行测试，结果可以重复；如果试验涉及多个临床机构，血样可冻存、运输到实验室进行检测。
以上信息由专业从事酶联免疫斑点读板机检测生产厂家的世联博研于2024/12/28 6:51:18发布
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