T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性免疫反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他细胞因子,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身免疫性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病感染患者的测试。
酶联免疫斑点实验装置供应商原理
将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养,在有刺激的条件下,细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后,被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识,其后再与酶标记的亲和素作用,并加入底物使其呈色,有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stained spots。
1. 加入细胞到含有(或不含)刺激物中培养;
2. 阳性细胞开始分泌细胞因子,细胞因子就近被包被Antibody捕获;
3. 移出细胞,清洗板子,加入生物素标记的检测Antibody,形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构;
4. 为了观察膜上斑点的形成,加入酶标记的亲和素;
5. 加入显色底物,在酶的催化分解下,生成不可溶的色素,就近沉淀在局部的膜上形成斑点;
6. 斑点计数(可用bioreader自动读板仪计数),数据处理,结果分析。
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高分辨率高特异性:
通过使用“光度”强度照明和渐变来区分真/假斑点,对于双色和荧光团来说,更精QUE的3D量化,增强斑点与背景的对比度,有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”,提高检测精度。唯YI能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因ZI分泌的照明系统
适用各种载玻片、35-100mm培养碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培养板和滴定板。对于实验室常用的U-Cytech公司、Mabtech公司、 R&D公司、 Diaclone公司、 Millipore公司、Whatman公司、 Nunc公司等各型实验室常用ELISPOT KIT(透明板、白色板、PVDF和尼龙膜板)、Greiner等公司的透明培养板、不透明(白色)培养板、以及PVDF膜培养板均适用,检测Elispot斑点同时可以分析肿LIU细胞的集落、克long斑、病毒斑的识别。
您可以从任何来源和细胞系(无论是人还是动物)中选择Elispot分析
为什么选择酶联免疫斑点实验装置供应商?
高灵敏度:20万-30万中1个阳性细胞检测率;
直观、可信度高:单细胞水平检测,一个阳性细胞一个斑点,斑点数量代表分泌细胞因子的细胞数量多少,斑点大小代表该细胞分泌细胞因子水平的多少;
高通量:一块ELISPOT板可作96test,科研工作者每天可检测数百个样品,只需少量细胞如45mL血液就足以用于测试600种不同抗原/肽类物质的反应;
Living cells功能检测:检测到的细胞因子不是已存在的,而是在检测过程中,被加入的刺激物刺激而分泌出来的;
临床实验适用:经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能,对临床试验非常重要,Before and after treatment的样本可以进行平行测试,结果可以重复;如果试验涉及多个临床机构,血样可冻存、运输到实验室进行检测。
以上信息由专业从事酶联免疫斑点实验装置供应商的世联博研于2024/7/1 7:53:29发布
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