T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性免疫反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他细胞因子,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身免疫性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病感染患者的测试。
BIOREADER 5000 V γ价格已成功应用领域
01感染性疾病诊断与研究
ELISPOT除了作为一种科研工具,也被用于临床诊断。近期First个被SFDA批准的基于ELISPOT法的诊断平台(T-Spot.TB)上市。这项用于检测tuberculosis感染的测试方法,是通过测量tuberculosis特异性抗原刺激后的IFN-γ分泌情况来检测特异性的T细胞免疫反应。它可以代替传统的皮肤测试,同时大大提高了敏感性和特异性,并且不受卡介苗接种影响。ELISPOT还可用于其他感染性疾病如乙型hepatitis、丙型hepatitis、EB病毒、巨细胞病毒、莱姆病等的抗感染免疫研究与诊断。
02vaccine研究
ELISPOT方法是检测和评价vaccine的细胞免疫水平的国际公认的标准工具。国际上普遍采用IFN-γ ELISPOT法监测HIV vaccine研究中的免疫应答反应,在国际AIDS vaccine行动计划中的大量监测新型HIV候选vaccine的试验中采用ELISPOT法对评价T细胞功能。ELISPOT方法是通过测量vaccine诱导较强T细胞反应的能力,来定义vaccine的效果。在vaccine研发和设计时,可应用ELISPOT方法筛选确定抗原的特异性T细胞表位;这些信息还可以被用于评估合适的免疫策略以及免疫途径。
BIOREADER 5000 V γ价格(ELISPOT)的原理是什么呢
(一)原理:细胞受到刺激后局部产生细胞因子,被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后,再与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
(二)ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应,在Microplate reader上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从20万~30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb,在研究者以刺激剂activation细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。
以上信息由专业从事BIOREADER 5000 V γ价格的世联博研于2025/5/1 5:59:06发布
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