PCR革新技术-英国TwistDx Inc公司开发恒温扩增RPA
英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)--被称为是可以替代PCR的核酸检测技术,目前新的等温扩增检测技术。以此为基础的TwistAmp® 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。
常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤,而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的适宜温度在37°C - 42°C之间,无需变性,在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。
据介绍,RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可以检出的水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理,适用于无法提取核酸的实地检测。
RPA不仅可以对扩增产物进行终点检测,还可以对扩增过程进行实时监控,甚至可以通过试纸条(侧流层析试纸条LFD)读取结果。
目前,TwistAmp® 试剂盒的扩增子长度在500bp以内。不过,经过特别优化的RPA扩增,也可以生成更长的扩增产物,或者减慢扩增速度(便于定量),甚至在更低的温度下进行反应。
RPA的特性
1. 快速检测15min进行单分子检测试验
2.简易包装稳定冻干形式试剂
3. 无需热循环过程摆脱任何仪器束缚
4.便携设备要求低,贫瘠条件亦能完成检测
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TwistDx恒温扩增应用
TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。
RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的cDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。
试剂盒包括两类:①.TwistAmp冻干研发试剂盒(包括TwistAmp Basic试剂盒、TwistAmp exo 试剂盒和TwistAmp nfo 试剂盒共三种);②. TwistAmp液态研发试剂盒(包括TwistAmp Liquid Basic 试剂盒和TwistAmp Liquid exo 试剂盒共两种)
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TwistDx试剂盒
2018年,TwistDx推出了一系列全新的液态重组酶聚合酶扩增 (RPA)试剂盒,这些试剂盒非常适合需要不使用热循环仪就能在15分钟内完成 DNA/RNA 扩增的实验室以及想要灵活构建试验体系的研究人员使用。
TwistAmp® Liquid试剂盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA试剂,该形态对于在实验室执行 PCR 和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些试剂各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种 RPA 组分比例进行实验以优化试验。
除了具有室温稳定性的冻干态TwistAmp® RPA试剂盒这一旗舰产品,本次新推出的 TwistAmp® Liquid试剂盒是现场试验开发的理想之选。液体形态让实验室更容易地在日常工作中使用快速简单的RPA法(该方法有时甚至采用与PCR相同的引物)取代 PCR法,以及更容易地开发出定制的试验。
以上信息由专业从事TwistDx恒温快速扩增试剂盒批发的立博泰业于2020/10/28 13:45:32发布
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