培养基和试剂1 （固定底物技术酶底物法）检测试剂：MMO-MUG培养基2 无菌水样品的采集和保存1采样前准备：1.1 采样瓶：灭菌100毫升消毒带刻度容器。2 样品采样及注意事项2.1将已灭菌和封包好的采样瓶，无论在什么条件下采样时，均要小心开启包封纸和瓶盖，避免瓶盖及瓶子颈部受杂菌污染，并注意在使用船只或附带的采样绳等附加设备采样时可能造成的污染。2.2 在采集江、河、湖、库、地表水样时，可握住瓶子底部直接将采样瓶插入水中，约距水面10~15厘米处，瓶口朝来水方向，使水样灌入瓶内。如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直至充满水样为止。采好样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。采样后，采样瓶内上部应留有一些空隙，以便检验前充分混匀水样。2.3 用采样器采样时，将无菌的水样瓶放入架内。将采样装置放入水中。到达预定深度后，打开瓶塞，待水样灌好后，松开瓶塞的软绳，盖上瓶盖。再将整个装置提出水面。2.4 从自来水采集样品时，不要选用漏水的，采水前可先将水用酒精灯火焰灼烧灭菌或用70%的酒精溶液消毒水及采样瓶口，然后将水完全打开，放水数分钟后除去水管中的滞留杂质。采水时控制水流速度小心接入瓶内。2.5在同一采样点进行分层采样时，应自上向下进行，以免不同层次的搅扰；2.6采样完毕，应将采样瓶编号、作好采样记录。将记录下采样条件，填入采样表格内。2.7 样品的运输和保存采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验，一般从取样到检验不宜超过2小时，不然应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6小时，实验室接到送检样后，应将样品立即放入冰箱，并在2小时内着手检验。3 样品交接样品运回实验室后，由采样人员与质管科样品管理人员进行交接。4干扰与消除：防止操作过程中的污染，严格无菌操作。
大肠菌群检测操作步骤
1 水样稀释
检测所需水样为100mL。若水样污染严重，可对水样进行稀释。取10 mL水样加入到90 mL无菌水中，必要时可加大稀释度，水样按照10倍逐级稀释。
2 定性反应
用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样，加入培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解后，放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3 51孔定量盘法
3.1 用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样，加入培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。
3.2 将前述100mL水样全部倒入51孔无菌定量盘内，以手抚平定量盘背面以赶除孔气泡，然后用程控定量封口机封口。放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3.3 无需稀释检测范围：1-200MPN/100mL粪大肠菌群（耐热大肠菌群）
4 97孔定量盘法
4.1 将100mL水样全部倒入97孔无菌定量盘内，其余步骤与6.3.1、6.3.2条款相同。
4.2 无需稀释检测范围：1-2419MPN/100mL粪大肠菌群（耐热大肠菌群）
水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释：制备水样10-1、10-2的稀释液，方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中，充分振荡使混合均匀，并使其中的细菌尽量呈单个存在，即为10-1稀释液；再从10-1制备10-2稀释液。以此类推，稀释到所需倍数。2、接种和培养：以无菌操作于5支三倍浓缩培养基（接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无气泡）中各加入水样10mL，5支普通培养基试管中加入水样1mL，5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL， 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察：37℃中培养24h后取出观察，观察有无气体（杜汉氏小管内有无气体）和酸产生（培养基有无变色）。在48h之间，培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累，或培养基颜色从紫色变为黄色，便可初步断定为阳性反应。
程控定量封口机问题故障及解决方法
故障：信号指示灯
1、电源指示灯不亮。
①查验是不是正确连接开关电源，工作电压是不是相符合;
②检查设备后边的电源总开关键是不是开启;
③查验保险丝有没有毁坏，如损坏进行更换。
2、加热十分钟后绿色指示灯才亮起。及时联系生产厂家，让技术人员处理。
3、绿色指示灯在使用时灭掉。加热辊没有达到密封温度，等绿灯变亮后再次进行操作。
4、绿色指示灯熄灭，仪器底部有液体漏。一般为水质采样超过100ml或设备倾斜所致，通常伴随“嘶嘶”声，此时只需拆下设备正面底座挡板，将积水擦干净即可。
以上信息由专业从事酶底物法封口机销售的格维恩于2024/3/28 14:19:42发布
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