大肠实验方法原理
所谓大肠菌群，是指在37℃培养24h 内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢的总称。主要由肠科中四个属内的细菌组成，即埃希氏属、柠檬酸属、克雷伯氏菌属和肠属。
水的大肠菌群数是指100 mL水检样内含有的大肠菌群实际数值，以大肠菌群近似数（MPN）表示。在正常情况下，肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽孢等多种细菌。这些细菌都可以随人畜排泄物进入水源，由于大肠菌群在肠道内数量多，所以，水源中大肠菌群的数量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。目前，国际上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。
酶底物法封口机优势特点
酶底物法检测为GB5750-2006、HJ1001-2018收录的用于大肠检测的标准方法，是目前水中大肠检测的方法。凭借方便快捷、假阳性低、适用大量样品快速检测等显著优势，正逐步被国内检测部门所认可。
相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高。检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景。可及时检测、预防，很大限度地降低重大公共安全事故的发生几率。
水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释：制备水样10-1、10-2的稀释液，方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中，充分振荡使混合均匀，并使其中的细菌尽量呈单个存在，即为10-1稀释液；再从10-1制备10-2稀释液。以此类推，稀释到所需倍数。2、接种和培养：以无菌操作于5支三倍浓缩培养基（接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无气泡）中各加入水样10mL，5支普通培养基试管中加入水样1mL，5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL， 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察：37℃中培养24h后取出观察，观察有无气体（杜汉氏小管内有无气体）和酸产生（培养基有无变色）。在48h之间，培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累，或培养基颜色从紫色变为黄色，便可初步断定为阳性反应。
多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖产酸产气的特征，检测水样中大肠菌群的方法。多管发酵的大肠菌群阳性，如果在44.5℃的培养基上进行24h的培养，能释放出荧光产物而使培养基在紫外光源的照射下呈现荧光反应，此种方法即可检测出样本中是否含有大肠，具体步骤：取一定量水样于乳糖蛋白胨培养液中进行初发酵实验(推测实验)，再进行平板分离(证实实验)复负发酵实验鉴定(完成实验)。
根据各稀释度发酵的管数查可能数(mostprobablenumber，MPN)表，求得每10mL或每升水样中的大肠菌群数。该法方法简单，实验的要求和成本低，但是该方法易受其他因素的干扰而影响结果的准确性。
以上信息由专业从事酶底物法封口机供应商的格维恩于2024/3/28 6:50:23发布
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